微孔膜过滤除菌器操作步骤:
1、组装、灭菌
将0.22μm孔径的滤膜装入清洗干净的塑料滤器中,旋紧压平,包装灭菌后待用(0.lMPa,121.5℃灭菌20min)。
2、连接
将除菌器的入口在无菌条件下,以无菌操作方式连接于装有待滤溶液(2%葡萄糖溶液)的注射器上,将针头与出口处连接并插入带橡皮塞的无菌试管中。
3、压滤
将注射器中的待滤溶液加压缓缓挤入过滤到无菌试管中,滤毕,将针头拨出。压滤时,用力要适当,不可太猛太快,以免细菌被挤压通过淀胶。
4、无菌检查
无菌操作吸取除菌滤液0.1ml于肉汤蛋白胨平板上,涂布均匀,置37℃温室中培养24h,检查是否有菌生长。
5、清洗
弃去塑料滤器上的微孔滤膜,将塑料滤器清洗干净,并换上一张新的微孔滤膜,组装包扎,再经无菌后使用。整个过程应在无菌条件下严格无菌操作,以防污染,过滤时应避免各连接处出现渗漏现象。
此法除菌的好处是能够不损坏溶液中各种物质的化学成分,适用于酶、朊、核酸、抗生素、病毒等活性分子的过滤,但由于滤量有限,所以一般只适用于试验室中小量溶液的过滤除菌。跟着反渗透技能的逐步老练和成本下降,大规模的过滤除菌工业使用也现已呈现,微孔膜过滤除菌器在矿泉水、纯净水出产制造过程中已有使用。